Ultrazvučni homogenizator

Često postavljana pitanja o slomljenim ćelijama http://www.scientzbio.com/

Koji su uslovi za ultrazvučenje Streptomyces (actinomycetes)?

Analitički: aktinomiceti pripadaju (G + C) molarnom procentu (mol%) Gram-pozitivne (Eubacteria) granične grupe na filogenetskom stablu prokariotskog sistema, koji ima molekularne i biološke karakteristike jedinstvene za prokariote. Međutim, u svojim različitim grupama, hemijski sastav ćelijskog zida varira u velikoj meri.

U ultrazvoku E. coli koristi se 400W, a metod razbijanja 5s za 5s je efikasan, ali se koristi na Streptomycesu, a nema efekta zbog razlike u sastavu ćelijskih zidova. Pretresno lečenje Streptomyces (actinomycetes) uglavnom je konfigurisano na određenu koncentraciju suspenzije bakterija. Specifični uslovi za drobljenje korišćenjem ultrazvučnog ćelijskog poremećaja su: sakupljanje bakterija u 24 h kulturnom rastvoru na 5 000 r / min tokom 5 min da bi se sakupljale ćelije; pranje s pH 7.5 Na2HPO -NaH2PO puferom 3 puta, a zatim su ćelije formulisane u suspenziju bakterija 1: 3 pomoću pufera. Postavljena u 40 ml plastičnu epruvetu; postavite veliku plastičnu epruvetu u ledeno kupatilo i uništite ga sa ultrazvučnim ćelijama (sonda snage 200W, 1/2 ", zatezanje 30s, prekidna 30s), rastvor za drobljenje na 12000 r / min Centrifuga pri visokoj brzini od 30 min, sakupljaju ćelijski ostaci i supernatant, a ćelije za pranje se takođe jednom mogu oprati pomoću prethodno hlađenog soli ili Tris-HCl pri pH 8. Pored toga, ultrazvučna doza varira u velikoj mjeri sa količinom uzorka i bakterija, a moć može biti 400- 600w, drobljen za 5s, zaustavljen za 5s, ledena kupka, a konačna koncentracija od 1mM PMSF se dodaje.Za određivanje odgovarajućeg ultrazvučnog intenziteta i frekvencije potrebno je provjeriti da li su bakterije u potpunosti slomljene u bilo koje vrijeme.